Определение общего числа микроорганизмов

Пробу воды перемешивают и отбирают стерильной пипеткой определенное количество воды для посева: для чистых вод 1 – 0,1 мл, для загрязненных 0,01 – 0,001 мл. Количество от 1 до 0,1 мл без разведения вносят в стерильную чашку Петри под слегка приподнятую крышку. Количество менее 0,1 мл вносят в разведенном виде: в пробирку с 9 мл стерильной воды вносят 1 мл испытуемой и далее берут из этой пробирки стерильной пипеткой от 1 до 0,1 мл, сеют на чашки. После посева воды в чашку Петри заливают 10 мл расплавленного и остуженного до 45 ^оС агара.. Воду быстро смешивают с агаром, слегка наклоняя и вращая чашку. Чашку Петри оставляют на столе до затвердевания среды , а затем помещают в термостат вверх дном на 24 ч при 37 ^оС.

Подсчет колоний производят с помощью лупы и сетки Вольфгюгеля в 12 квадратах по 1 см². Общее число подсчитанных колоний делят на число просмотренных квадратов (12), а затем умножают на площадь чашки, выраженную в см². расчет ведется по формуле: (π · r² · а) : 12

где: π · r² – площадь чашки Петри в см2; а – количество колоний; 12 – количество подсчитанных квадратов.

Пример расчета:В чашку Петри был засеян 1 мл исследуемой воды. При подсчете в 12 квадратах было найдено 189 колоний. Диаметр чашки Петри 10 см. Количество микроорганизмов (колоний) в 1 мл воды составляет:

3,14 · 5² · 180 = 1177 микроорганизмов

12