logo
UMKD_Enzimologia_Lektsii

Электрофорез

Электрофорез считается очень эффективным способом разделения белков. Принцип разделения белков методом электрофореза заключается в том, что молекула белка в растворе при любом рН, отличающемся от ее изоэлектрической точки, имеет заряд. Это приводит к тому, что белок движется в электрическом поле. Движущая сила определяется величиной напряженности электрического поля Е умноженной на суммарный заряд частицы z. Этой силе противостоят силы вязкости среды, пропорциональные коэффициенту вязкости η, радиусу частицы r (стоксовскому радиусу) и скорости v.

Ez = 6πηrv

Удельная подвижность:

u = z / 6πηrv

Таким образом, молекулы приобретают разные скорости в зависимости от величины заряда и размеров.

После отключения тока гель помещают в специальный раствор, где интересующие исследователя белки окрашиваются. Существует электрофорез в растворе, но он имеет ограниченное применение, т.к. исследуемые белки часто подвергаются значительному диффузионному размыванию. Однако сейчас стало возможным применять этот метод в условиях невесомости в космосе, что устраняет конвекционные токи, обуславливающие диффузионную размывку.