Металлохелатная аффинная хроматография

Металлохелатная аффинная хроматография является наиболее распространенным методом очистки рекомбинантных белков. Один из приемов металлохелатной аффинной хроматографии основан на том, что некоторые аминокислоты, в частности, гистидин, способны формировать комплексы с ионами металлов. После иммобилизации на хроматографической фазе хелатирующих групп, целевой рекомбинантный белок, содержащий блок из нескольких остатков гистидина связывается с хроматографической фазой, после чего сопутствующие белки отделяются, и проводится элюция целевого белка. Кроме блока из остатков гистидина, целевой рекомбинантный белок может содержать последовательности глутатион-S-трансферазы, S-белка и других, при этом принципы хроматографического выделения целевого рекомбинантного белка остаются теми же. Недостатком метода является то, что создание соответствующего сорбента для этого вида хроматографии требует значительных усилий и сопряжено с серьезными методическими трудностями. В процессе эксплуатации сорбента происходит "вымывание" ионов металла из активных центров носителя, что сопровождается ухудшением его сорбционных характеристик.