logo
UMKD_Enzimologia_Lektsii

Высокоэффективная жидкостная хроматография

Отличительной особенностью метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) является наличие в аппаратуре специальных насосов, позволяющих с высокой скоростью продавливать жидкую фазу через колонку, имеющую диаметр частиц от 3 до 15 мкм, а также наличие высокочувствительных детекторов для обнаружения разделенных веществ. Хроматографы для ВЭЖХ включают несколько блоков: дегазатор (для удаления растворенного кислорода из растворителей), насос, термостат, детектор (УФ, рефрактометр и др.) (рис. 1.2.7). На хроматограф могут быть установлены различные колонки: ионообменные, гельфильтрационные, гидрофобные и др.

При разделении высоколабильных белков высокое давление нежелательно, поэтому применяют хроматографию при среднем давлении.

Рис. 1.2.7. Схема высокоэффективного жидкостного хроматографа. 1 – резервуар для элюента, 2 – насос, 3 – инжектор для ввода пробы, 4 – колонки для ВЭЖХ, 5 – термостат, 6 – детектор с проточной кюветой, 7 – регистрирующая система, 8 – персональный компьютер.