Тема: Конечные пути распада белков. Образование и обезвреживание аммиака.

ЦЕЛЬ: 1.Изучить пути распада белков и обезвреживание аммиака.

2.Ознакомиться с методом количественного определения мочевины в крови и моче. Уметь интерпретировать результаты анализов.

ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ВОПРОСЫ ДЛЯ ПОДГОТОВКИ К ЗАНЯТИЮ.

1. Катаболизм аминокислот. Образование, транспорт и обезвреживание аммиака.

• Какими путями и где в организме образуется аммиак?

• Что представляет собой транспортная форма аммиака?

• Откуда и куда аммиак переносится?

• Назвать механизмы детоксикации аммиака и охарактеризовать роль каждого из них.

2. Биосинтез мочевины.

• Назвать последовательность реакций орнитинового цикла, ферменты. Каково происхождение атомов молекулы мочевины? Сколько молекул АТФ и в каких реакциях затрачивается на синтез одной молекулы мочевины?

• Написать суммарное уравнение орнитинового цикла.

• Циклы синтеза мочевины и трикарбоновых кислот, изученные Кребсом, тесно взаимосвязаны, что получило название “двухколесного велосипеда Кребса”. Найти три основных пункта взаимосвязи этих циклов.

3. Синтез глутаминовой кислоты путем восстановительного аминирования.

4. Синтез глутамина: химизм, характеристика фермента, биологическое значение.

5. Принцип образования солей аммония. Активация глутаминазы почек. Биологическое значение образования солей аммония. Гипераммониемия.

6. Азот крови: общий азот, белковый и остаточный азот. Азот мочи: общий азот, мочевина и другие азотсодержащие соединения. Величина суточного выделения мочевины. Значение определения остаточного азота и мочевины в крови и моче.

7. Решите ситуационные задачи:

1. Человек массой тела 70 кг ежедневно получает с пищей 3000 ккал энергии и выделяет 37 г мочевины (М=60). Рассчитайте процент энергии, который компенсируется белками. Учесть, что прием 1 г белка дает 4 ккал и сопровождается выделением 0,16 г азота в виде мочевины.

2. У больного с заболеванием печени содержание мочевины в крови 2 ммоль/л, за сутки с мочой выведено 13 г. О нарушении какой функции печени можно думать? Какие ферменты исследовать для проверки предположения?

3. В крови и моче пациента обнаружена повышенная концентрация аммиака и цитруллина. Укажите возможную причину этого. Как можно проверить ваше предположение?

4. Недостаточность какого фермента орнитинового цикла можно предположить, если в крови и моче пациента обнаружено снижение содержание мочевины и повышение аммиака, цитруллина, аргинина?

5. С суточным количеством мочи выделяется 18 г общего азота. Рассчитайте какой процент составляет мочевина в общем азоте, если ее суточное выделение 30г.

6. У больного базедовой болезнью в крови содержание общего белка 60 г/л, остаточного азота 45 ммоль/л. С мочой за сутки выделяется 24г азота. Дайте заключение о состоянии белкового обмена, объясните механизм сдвигов.

Лабораторная работа.

Определение мочевины в крови унифицированным методом

Клинико-диагностическое значение метода.

В норме в сыворотке крови содержится мочевины 3,33-8,32 ммоль/л. Примерно 50% остаточного азота крови приходится на долю мочевины.

Снижение содержания мочевины отмечается при поражении печени (гепатит, цирроз), сопровождающихся резким снижением функции мочевинообразования;

Содержание мочевины может повышаться при нефритах, лихорадочных состояниях, сепсисе, туберкулезе почек и других.

Принцип метода.

Мочевина образует с диацетилмонооксимом в сильнокислой среде при наличии тиосемикарбазида и солей железа при нагревании окрашенный комплекс, который фотометрируют при длине волны 490-540 нм.

ХОД РАБОТЫ

1. В три стеклянные пробирки отмерить компоненты, перечисленные в таблице, и содержимое их тщательно перемешать.

   № п/п	Отмерить(мл)	Проба	Эталон	Контроль
   1. 2. 3. 4.	Сыворотка крови Реактив №1(эталон мочевины) Вода дистиллированная Реактив №2 (рабочий раствор) (раствор №1:раствор №2 – 1:2)	0,01 - - 2,00	- 0,01 - 2,00	- - 0,01 2,00

2. Пробирки закрыть алюминиевой фольгой и поместить в кипящую водяную баню на 10 мин.

3. Пробирки охладить в токе воды 2-3 мин.

4. Фотометрировать до 15 мин от начала охлаждения опытную пробу (А₁) и эталон (А₂) против контрольного раствора.

5. Расчет проводить по формуле:

   Мочевина (ммоль/л)=16,65ЕА₁/ЕА₂

ЛИТЕРАТУРА ДЛЯ ПОДГОТОВКИ К ЗАНЯТИЮ. Основная:

1. Берёзов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия: Учебник. – 3-е изд., перераб. и доп. - М.: Медицина, 2002, с. 446-451.

2. Биохимия: Учебник/Под ред. Е.С. Северина. –М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003, (Серия XXI век), с. 476-489.

3. Николаев А.Я. Биологическая химия. М.: Медицинское информационное агентство, 2001, с. 315-323.

4. Северин Е.С., Алейникова Т.Л., Осипов Е.В. Биохимия: Учебник. –М.: Медицина, 2000, с. 142-146.

5. Лекционный материал.

Дополнительная литература:

1. Биохимия. Краткий курс с упражнениями и задачами /Под ред. Члена-корренспондента РАН, проф. Е.С. Северина, проф. А.Я. Николаева. М.: ГЭОТАР-МЕД. 2001. -448 с.: ил. – (XXI век).

2. Марри Р. и соавтор. ‘‘Биохимия человека’’ М.: Мир, 1993, т. 1.

3. Клиническая биохимия /Под ред. В.А. Ткачука –М.: ГЭОТАР-МЕД, 2002. -360 с. –(Серия XXI век)

4. Клиническая биохимия /Пер. с англ. –М. –СПб.: «Издательство Бином» - «Невский Диалект» 1999. -368 с., ил.