Лабораторная работа

Работа № 1.

Подсчет эритроцитов в исследуемой крови.

Для подсчета количества эритроцитов используется счетная камера Горяева. Она представляет собой толстое стекло, в средней части которого имеет­ся 4 желобка. Между ними образуются 3 узкие пластинки. Средняя пластинка ниже боковых на 0,1 мм и разделена пополам поперечным желобком. По обе стороны от желобка расположены сетки Горяева. Так как высота боковых пла­стинок на 0,1 мм больше средней, то при наложении на них покровного стекла над сеткой образуется камера глубиной в 0,1 мм. Сетка Горяева состоит из 225 больших квадратов Каждый третий квадрат разделен дополнительно попереч­ными и продольными линиями на 16 маленьких квадратиков. Таких больших квадратов, разделенных на малые, в сетке 25. Сторона малого квадратика рав­няется 1/20 мм, площадь - 1/400 мм². Так называемый «объем малого квадрата» равен 1/400 мм³.

Для счета эритро­цитов кровь разводят в 200 раз 1% раствором хлорида натрия. Для разведения крови используют особый эритроцитарный меланжер (смеситель)

Считают количество эритроцитов в 80 малых квадратах, т.е. в 5 боль­ших, разделенных на 16 малых. Поскольку эритроциты располагаются в беспо­рядке и некоторые из них лежат на границах квадратов, для получения точного результата принято считать эритроциты, лежащие внутри квадрата и на верхней и левой границах. Вычисляют среднее количество эритроцитов в 1 мм³неразведенной крови по формуле:

Х = А х 4000 х 200

80

где Х – число эритроцитов в 1 мкл крови

А – количество эритроцитов, найденных в 80 квадратах

200 – разведение крови

4000 - 1/4000 мкл объем камеры над малым квадратом

80 – число просмотренных квадратов.

В выводе необходимо обсудить полученный результат и причины возможных отклонений изучаемого показателя.

Работа № 2.

Определение количества гемоглобина в крови методом Сали.

Налить в градуированную пробирку гемометра 0,1 нормальный раствор соляной кислоты до нижней градуированной метки. Затем набрать специальной пипеткой 20 куб. мм исследуемой крови и смешать ее с раствором соляной кислоты в пробирке. Через 5 мин образуется солянокислый гематин.

Добавлять пипеткой, при помешивании раствора стеклянной палочкой, дистиллированную воду, пока окраска раствора не совпадет со стандартом. Шкала показывает количество гемоглобина в граммах процентах 1 куб. мм. крови. Цифра, стоящая на уровне мениска полученного раствора, показывает содержание гемоглобина в исследуемой крови. Окончательный результат выразить в г/л.

При оформлении протокола кратко опишите ход работы, на­рисуйте в тетради гемометр Сали. Обсуждая результаты работы, дайте функ­циональную характеристику разных видов и соединений гемоглобина, физио­логическое обоснование медицинского значения показателя гемоглобина в пе­риферической крови человека, сопоставьте данные, полученные в нескольких пробах крови, проанализируйте, соответствуют ли они норме.

Работа № 3

Вычисление цветового показателя (фарб-индекса).

Цветовой показатель отражает относительное содержание гемоглобина в эритроците. Вычисляют цветовой показатель определением от­ношения двух частных, полученных от деления количества гемоглобина на ко­личество эритроцитов в норме и количества гемоглобина на количество эрит­роцитов в исследуемой крови по формуле :

Х гем Х эр

-------- : --------

NгемNэр

Xгем. - количество гемоглобина в исследуемой крови

N гем. - нормальное количество гемоглобина (используют стандартный показатель – 167 г/л)

Xэр. - количество эритроцитов в исследуемой крови

N эр. - нормальное количество эритроцитов (используют стандартный показатель – 5 х 10¹²/л)

Вычислите цветовой показатель исследуемой крови, используя полученные в работах № 1 и 2 показатели. В выводе оцените полученный параметр, укажите возможные отклонения параметра и их физиологические обоснования.