4.5. Характеристика мутантного штаму-продуценту треоніну Brevibacterium flavum iмв в-7446
Визначили морфологічні та фізіолого-біохімічні особливості штаму: клітини після 24 годин культивування на МПА були аспорогенними, часто розташованими під кутом паличками розміром 0,7-1,0х2,0-4,0 мкм. Клітини з часом вкорочувались до коковидних. Грам-позитивний мікроорганізм. При рості на МПА колонії були круглі, блискучі, непрозорі, жовтого кольору (рис. 4.7). Штам є ауксотрофним мутантом. По відношенню до кисню штам – аероб.
Штам B. flavum ІМВ В-7446 засвоював азот у вигляді солей амонію, утворював кислоту в середовищі з глюкозою, арабінозою і маннітом. На середовищі різного складу, де джерелом вуглецю була глюкоза або цукроза, клітини синтезували треонін.
Рис. 4.7 Колонії мутантного штаму B. flavum IМВ В-7446 на середовищі МПАзб. (збільшення 40х)
Ріст штаму відбувався за температури 20 – 400С, оптимальною для синтезу була температура 320С та при зміні рН в діапазоні від 4,0 до 9,0, оптимальним значенням рН було 7,0.
Галузь використання штаму: на мелясному середовищі штам в колбах (на качалках) був здатний накопичувати 7,5-7,9 г/дм3 треоніну. Штам зберігали на середовищі МПАзб. протягом 6 місяців за температури +4 оС.
Продукти, що синтезував штам: амінокислоти аспартатної родини.
Активність штаму. Визначалась за продукцією цільової амінокислоти методом тонкошарової хроматографії в культуральній рідині після 3-4 діб культивування за температури 320С.
Довгострокове зберігання штаму. Штам зберігався на скошеній поверхні м'ясо-пептонного агару за температури 40С протягом півроку і як ліофілізований матеріал.
Спосіб, умови та склад середовища для культивування штаму. Штам культивувався за температури 320С на середовищі з глюкозою за умов аерації.
Генетичні особливості штаму. Штам – мутантний; мав чутливість до азитроміцину, не чутливий до тетрацикліну.
За результатами морфологічного та фізіолого-біохімічного аналізу культура була ідентифікована як B. flavum [182].
- Національна академія наук україни
- Перелік умовних скорочень
- Розділ 1 огляд літератури
- 1.2. Способи отримання цільових амінокислот
- 1.3. Продуценти лізину та треоніну
- 1.4. Регулювання та шляхи інтенсифікації біосинтезу лізину та треоніну
- Розділ 2 матеріали і методи досліджень
- 2.1. Штами-продуценти
- 2.2. Умови культивування та поживні середовища
- 2.3. Дослідження ауксотрофності
- 2.4. Дослідження впливу мутагенних факторів на штами-продуценти лізину та треоніну
- 2.5. Філогенетичний аналіз
- 2.6. Біохімічні та фізичні методи аналізу
- 2.7. Статистичне оброблення експериментальних результатів
- Розділ 3 клоновий аналіз штамів-продуцентів лізину та треоніну
- 3.1. Проведення клонового аналізу штамів-продуцентів лізину
- Біосинтез лізину штамами Brevibacterium
- Накопичення лізину клонами штамів Brevibacterium на 60 годину культивування на ензиматичному мелясному середовищі
- 3.2. Дослідження ауксотрофності штамів-продуцентів лізину
- Визначення ауксотрофності клонів Brevibacterium на твердому мс з сахарозою
- Вплив амінокислот аспартатної родини на біосинтез лізину клонами
- 3.3. Визначення ауксотрофності штаму-продуценту треоніну
- Визначення ауксотрофності у b. Flavum тн7
- Розділ 4 отримання мутантних штамів-продуцентів лізину та треоніну
- 4.1. Вплив уф-опромінення на штами-продуценти лізину
- Утворення мутантних штамів під дією уф
- Чутливість вихідних та мутантних штамів до антибіотиків
- Синтез цільової амінокислоти та коефіцієнти конверсії джерел живлення
- 4.2. Вплив хімічного мутагенезу (ntg) на штами-продуценти
- 4.3. Здійснення уф-мутагенезу штаму-продуценту треоніну
- Утворення мутантних штамів b. Flavum тн7 під дією уф
- Чутливість вихідного та мутантних штамів до антибіотиків
- 4.4. Характеристика мутантного штаму-продуценту лізину Brevibacterium sp. Imb b-7447
- 4.5. Характеристика мутантного штаму-продуценту треоніну Brevibacterium flavum iмв в-7446
- 4.6.Порівняння послідовностей гена 16s рРнк у різних штамів-продуцентів лізину
- 4.7. Порівняння послідовностей гена 16s рРнк у різних штамів-продуцентів треоніну
- Розділ 5 оптимізація умов культивування мутантних штамів-продуцентів лізину та треоніну
- 5.1. Оптимізація умов культивування мутантного штаму-продуценту лізину
- 5.2. Оптимізація умов культивування мутантного штаму-продуценту треоніну
- Вплив ростових факторів на синтез треоніну
- Синтез треоніну на середовищі з різним вмістом амінокислот
- Синтез треоніну штамом b. Flavum iмв в-7446
- Розділ 5 узагальнення отриманих результатів
- Висновки
- Список використаної літератури
- Паспортизація штаму-продуценту треоніну
- Паспортизація штаму-продуценту лізину Brevibacterium sp. Imb b-7447