Визначення ауксотрофності клонів Brevibacterium на твердому мс з сахарозою
Середовища, амінокислоти | КЛОНИ | |||||
2 | 5 | 6 | 7 | 8 | 11 | |
Контроль ПС | +++ | +++ | +++ | +++ п | +++ | +++п |
Контроль МС | - | - | - | - | - | - |
Аспарагін | - | - | - | - | - | - |
Треонін | - | - | ++ | - | + | + |
Ізолейцин | - | - | + | - | + | - |
Лейцин | +++ | +++ | +++ | +++ п | +++ п | +++п |
Тирозин | - | - | - | - | + | - |
Метіонін | - | + | ++ | + п | - | + |
Триптофан | + | + | +++ | - | - | + |
Гомосерин | + | - | +++ | - | - | + |
Примітка. +++ - інтенсивний ріст; + - наявність росту;– - відсутність росту; п– жовтий пігмент.
Як видно з таблиці 3.3 всі клони були лейцинозалежними і набули ауксотрофності до метіоніну (№ 5, 7, 11), треоніну (№8, 11), ізолейцину (№8), триптофану (№2, 5, 11) та гомосерину (№2, 11). Ріст клону №6 був позитивним на МС.
В подальших дослідженнях було здійснено культивування штамів-продуцентів на рідкому середовищі МС з амінокислотами тільки аспартатної родини (табл. 3.4). Серед всіх клонів було вибрано три найбільш продуктивних (клони №6, №7, №11) за лізином (див. табл. 3.2).
На рідкому середовищі МС з різними амінокислотами було підтверджено ауксотрофність за лейцином та метионіном клону № 7, який інтенсивно ріс, продукуючи пігмент, змінюючи рН середовища і синтезуючи лізин та інші амінокислоти.
У дослідах, де був відсутній ріст (незначна зміна ОГ), продуктивність за лізином не визначали. У дослідах з аспарагіном та ізолейцином при незначній зміні рН та ОГ продуктивність за лізином не визначали.
Таблиця 3.4
- Національна академія наук україни
- Перелік умовних скорочень
- Розділ 1 огляд літератури
- 1.2. Способи отримання цільових амінокислот
- 1.3. Продуценти лізину та треоніну
- 1.4. Регулювання та шляхи інтенсифікації біосинтезу лізину та треоніну
- Розділ 2 матеріали і методи досліджень
- 2.1. Штами-продуценти
- 2.2. Умови культивування та поживні середовища
- 2.3. Дослідження ауксотрофності
- 2.4. Дослідження впливу мутагенних факторів на штами-продуценти лізину та треоніну
- 2.5. Філогенетичний аналіз
- 2.6. Біохімічні та фізичні методи аналізу
- 2.7. Статистичне оброблення експериментальних результатів
- Розділ 3 клоновий аналіз штамів-продуцентів лізину та треоніну
- 3.1. Проведення клонового аналізу штамів-продуцентів лізину
- Біосинтез лізину штамами Brevibacterium
- Накопичення лізину клонами штамів Brevibacterium на 60 годину культивування на ензиматичному мелясному середовищі
- 3.2. Дослідження ауксотрофності штамів-продуцентів лізину
- Визначення ауксотрофності клонів Brevibacterium на твердому мс з сахарозою
- Вплив амінокислот аспартатної родини на біосинтез лізину клонами
- 3.3. Визначення ауксотрофності штаму-продуценту треоніну
- Визначення ауксотрофності у b. Flavum тн7
- Розділ 4 отримання мутантних штамів-продуцентів лізину та треоніну
- 4.1. Вплив уф-опромінення на штами-продуценти лізину
- Утворення мутантних штамів під дією уф
- Чутливість вихідних та мутантних штамів до антибіотиків
- Синтез цільової амінокислоти та коефіцієнти конверсії джерел живлення
- 4.2. Вплив хімічного мутагенезу (ntg) на штами-продуценти
- 4.3. Здійснення уф-мутагенезу штаму-продуценту треоніну
- Утворення мутантних штамів b. Flavum тн7 під дією уф
- Чутливість вихідного та мутантних штамів до антибіотиків
- 4.4. Характеристика мутантного штаму-продуценту лізину Brevibacterium sp. Imb b-7447
- 4.5. Характеристика мутантного штаму-продуценту треоніну Brevibacterium flavum iмв в-7446
- 4.6.Порівняння послідовностей гена 16s рРнк у різних штамів-продуцентів лізину
- 4.7. Порівняння послідовностей гена 16s рРнк у різних штамів-продуцентів треоніну
- Розділ 5 оптимізація умов культивування мутантних штамів-продуцентів лізину та треоніну
- 5.1. Оптимізація умов культивування мутантного штаму-продуценту лізину
- 5.2. Оптимізація умов культивування мутантного штаму-продуценту треоніну
- Вплив ростових факторів на синтез треоніну
- Синтез треоніну на середовищі з різним вмістом амінокислот
- Синтез треоніну штамом b. Flavum iмв в-7446
- Розділ 5 узагальнення отриманих результатів
- Висновки
- Список використаної літератури
- Паспортизація штаму-продуценту треоніну
- Паспортизація штаму-продуценту лізину Brevibacterium sp. Imb b-7447