logo
Гилберт С

Гилберт с. Биология развития: в 3-х т. Т. 2: Пер. С англ. – м.: Мир, 1994. – 235 с.

МЕХАНИЗМЫ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ТРАНСКРИПЦИИ ГЕНОВ 143

Рис. 12.7. Влияние отдельных точковых мутаций в промоторе ß-глобинового гена мыши на способность промотора к инициации транскрипции. Каждая линия представляет уровень транскрипции с мутантного промотора по отношению к уровню транскрипции с глобинового промотора дикого типа, определяемому в параллельных опытах. Черными точками указаны нуклеотиды, для которых не были получены мутации. Под гистограммой представлена схема, показывающая положение ТАТА-бокса и двух 5'-элементов промотора в гене ß-цепи глобина мыши. (Из Maniatis et al., 1986.)

130 различных одиночных замен оснований. Полученные клонированные гены вводили в плазмиды, содержащие энхансер, и затем с помощью трансфекции – в культивируемые клетки, которые в обычных условиях не синтезируют глобин. Будут ли в таких клетках транскрибироваться усеченные глобиновые мРНК (475 оснований) с этих клонов? Результаты опытов показаны на рис. 12.7. В большинстве случаев мутации в 5'-фланкирующей области не влияли на эффективность транскрипции глобинового гена. Однако мутации в трех кластерах нуклеотидов резко снижали транскрипцию. Один кластер находился в ТАТА-боксе (боксе Голдберга–Хогнесса), другой – в переднем ЦАAT-элементе промотора, а третий – в участке ГЦЦАЦАЦЦЦ, от 95-й до 87-й пары оснований выше кэп-сайта.

Таблица 12.1. Основные пометы промотора, общие

для разных генов

Ген

ЦААТ –участок1)

ТАТА-участок1)

Гистон

Н2A (морской еж)

ГГАЦААТТГ(-85)

ТАТАААА(-34)

Н2В (морской еж)

ГАЦЦААТГА ( -92)

ТАТАААА(-26)

Н3 (морской еж)

ГАЦЦААТЦА ( - 75)

ΤΑΤΑΛΑΤ ( - 30)

Н2А (дрозофила)

АГТЦААТТС

ТАТАААТ

Н3 (дрозофила)

ЦГТЦАААТГ

ТАТААГТ

Глобин

α (мышь)

АГЦЦААТГА(-88)

ЦАТАТАА(-29)

α2 (человек)

АГЦЦААТГА (-70)

ЦАТАААЩ-28)

Коллаген

α2 тип I (курица)

ГЦЦЦАТТГЦ(-78)

ТАТАААТ

Инсулин

Человек

ГГЦЦАГТЦГ(-73)

ТАТАААГ(-29)

Крыса 1

ГТЦЦАААЦГ(-78)

ТАТАААГ(-3О)

Овальбумин

ГГТЦАААЦТ(-74)

ГАГАГАТ(-31)

Кональбумин

ГГАЦАААЦА(-81)

ΤΑΤΛΑΑΑ ( - 30)

Фибрион шелка

ГТАЦАААТА (–93)

ТАТАААА (-29)

Источник: Efstratiadis et al., (1980); Vogeli et al., (1981)

1) Числа в скобках указывают положение в 5’-области от точки, где инициируется транскрипция.