logo
лекции инженария 1-8

4. Лігази та дезоксинуклеотидилтрансфераза.

Одержані за допомогою рестриктаз фрагменти використовують для створення рекомбінантних молекул.

Існують різноманітні методи з'єднання нарізаних рестриктазами фрагментів у цілісну структуру. Фрагменти з липкими кінцями, які одержані за допомогою однієї рестриктази, можуть гібридизуватися один з одним або їх зшивають кінцевою дезоксинуклеотидилтрансферазою. Фрагменти з рівними краями з'єднують Т—4-лігазою (див. рис. 97). Вдається також зшивати фрагменти з рівними і липкими кінцями (рис. 100). Спочатку за допомогою ДНК-полімерази липкий кінець добудовується і стає рівним, а потім з'єднується з іншим Т—4-лігазою.

Отже, проблема нарізування генетичного матеріалу та його зшивання успішно розв'язана.