logo search
лекции инженария 1-8

5. Інші вектори (помірні фаги та косміди).

Другий метод, яким користуються дослідники для введення гена в бактеріальні клітини базується на використанні бактеріофага як вектора. Ген вбудовують в геном помірного фага, який містить 10-50 генів, і він реплікується разом з генами фага в бактеріальній клітині.

Для одержання рекомбінантних молекул з великими розмірами вставок (до 23 тис. п.н.) (в плазміду можна вбудувати лише вставку до 15 тис. п.н.) як вектор використовують ДНК λ-фага.

Вона має два сайти для дії рестриктази РІ. Кінцеві ділянки, які відрізуються нею, містять інформацію для розмноження фага. Середню частину ДНК λ-фага вирізають і на її місце вставляють фрагмент чужої ДНК, об’єднують її з кінцевими ділянками фагової ДНК. Зшивання фрагментів здійснює лігаза. Рекомбінантна молекула упаковується в білкову оболонку і утворюється зріла фагова частка здатна до розмноження.