Определение концентрации белка по методу Бредфорда

Метод Бредфорда -- один из колориметрических методов количественного определения белков в растворе. Метод основан на реакции красителя кумасси (coomassie) с аргинином и гидрофобными аминокислотными остатками. Связанная форма имеет голубую окраску с максимумом поглощения при 595 нм. Таким образом, увеличение адсорбции раствора при длине волны, равной 595 нм, пропорционально количеству белка в растворе.

В спектрофотометрическую кювету с длиной оптического пути 1 см мы вносили 0,1 мл раствора белка в 0,1 н NaOH, добавляли 2 мл раствора кумасси, перемешивали при комнатной температуре 2-3 минуты и быстро измеряли оптическую плотность смеси при 595 нм, используя в качестве контроля кювету, содержащую 0,1 мл 0,1 н NaOH и 2 мл красителя.