1. Патогенные актиномицеты

Актиномицеты (греч. actis – луч, mykos – гриб) представляют собой одноклеточные микроорганизмы, сходные по строению как с грибами, так и с бактериями. Актиномицеты широко распространены в природе, встречаются в почве, растениях, воздухе, злаковых культурах. Многие из них вырабатывают антибиотические вещества, способные подавлять жизнедеятельность других микроорганизмов. Эта способность используется в производстве антибиотических препаратов.

В патологии человека имеет значение Act. israeli, выделенный в 1891 г. И.Израэлом от больных актиномикозом людей. К патогенным актиномицетам, вызывающим истинный актиномикоз у животных, относят Act. bovis, открытый в 1877 г. К.Гарцем. Возбудитель включен в секцию 15, род Actinomyces.

Актиномикоз (Actinomycosis) – хроническая болезнь домашних и некоторых видов диких животных, характеризующаяся образованием соединительнотканных плотных узлов, гранулем, абсцессов и других поражений в различных органах и тканях.

Морфология. В пораженных тканях, гное Act. bovis обнаруживают в виде зерен, напоминающих крупинки песка. Эти структуры получили название «друзы». Друзы состоят из нитей актиномицетов, которые расходятся от центра в радиальном направлении в виде лучей, концы которых колбовидно или булавовидно утолщены. В центре друзы кроме густо переплетенного мицелия иногда присутствуют палочковидные элементы, окрашивающиеся по Граму в темно-фиолетовый цвет, концы утолщенных гиф мицелия по Граму не окрашиваются, т. е. они остаются красными. Механизм такого окрашивания друз по Граму до сих пор не выяснен. Величина друз колеблется от 20-40 до 150-320 мкм; в среднем она достигает 60-80 мкм.

На плотных питательных средах Act. bovis образует хорошо развитый несептированный одноклеточный мицелий в виде ветвящихся тонких нитей, достигающих 100-600 мкм в длину и 0,5-1,2 мкм в поперечнике. Актиномицеты хорошо окрашиваются всеми анилиновыми красителями, грамположительные. В молодых культурах мицелий однороден, в старой клетке мицелия появляются вакуоли, зернистость, капельки жира, оболочка становится хрупкой, легко ломается, что приводит к образованию палочковидных форм.

В жидких культурах актиномицет растет в виде шарообразных зернышек или крупинок, состоящих из густого сплетения мицелиальных нитей, хорошо окрашивающихся по Граму.

Культивирование. Act.bovis культивируют в анаэробных условиях при оптимальной температуре 37 ⁰С на агаре Сабуро, глюкозо-кровяном агаре при рН от 4,4 до 9,0. Рост медленный. На 15-30 сутки друзы после посева обнаруживают небольшие белые или желтоватые колонии в толще агара. Колонии могут быть гладкими или шероховатыми, напоминающими по виду цветную капусту, пушистыми или мучнистыми, бесцветными или пигментированными (синие, фиолетовые, желтоватые, красные, коричневые, зеленые, оранжевые и др.). Колонии с трудом снимаются с питательных сред.

При пересевах на МПА, МПЖ, свернутую сыворотку крови крупного рогатого скота, картофель, развиваются колонии аэробных актиномицетов, характерной особенностью которых является образование воздушного мицелия, на концах которого формируются споры, придающие поверхности колонии мучнистый вид.

В жидких средах – МПБ, молоке, сахарном бульоне, среде Чапека актиномицет растет в виде зернышек, пушинок или морщинистых пленок.

Биохимические свойства. Act. bovis ферментирует с образованием кислоты глюкозу, левулезу, галактозу, глицерин, разжижает желатин, разлагает белок с образованием сероводорода, свертывает молоко с последующей пептонизацией. В отличие от Act. israeli чувствителен к стрептомицину и нечувствителен к хлорамфениколу, гидролизует крахмал; на кровяном агаре с 1 % глюкозой в анаэробных условиях дает слабый гемолиз.

Антигенная структура. Act. bovis входит к серогруппу В, Act. israeli – в серогруппу D. У того и другого вида выявлены серовары 1 и 2, которые идентифицируют с помощью люминесцирующих антител.

Устойчивость. Актиномицеты весьма устойчивы к действию физико-химических факторов. Особенно резистентны их споры. Нагревание до 70-80 ⁰С убивает их в течение 5 минут, под воздействием солнечных лучей они гибнут через 3 ч, лучей ртутно-кварцевой лампы – через 30 минут. Низкая температура консервирует актиномицеты на 1-2 года, высушивание при комнатной температуре не убивает их до 6 лет. Сулема (1:1000) убивает через 5-6 минут, 3 % раствор формалина – за 5-7 минут, 5 % раствор хлорамина – за 3 ч, 5 % раствор лизола – за 30 минут. Лучший дезинфектант – щелочной раствор 3 % формальдегида.

Патогенность. Act. bovis вызывает болезнь у домашних, диких и лабораторных животных. У крупного рогатого скота актиномикозные поражения бывают на языке, коже головы, верхней части шеи, межчелюстного пространства, в костях челюсти, иногда на семенниках.

У свиней поражаются часть миндалин, вымя, реже челюстные кости и язык. У овец и коз локализация процесса и симптомы болезни такие же, как и у крупного рогатого скота. Известны случаи поражения легких. У лошадей актиномикомы могут быть в семенных канатиках, особенно после кастрации.

В экспериментальных условиях можно заразить многих домашних, диких животных, в том числе птиц. В качестве лабораторных животных используют птиц, кроликов, 3-4 недельных хомяков, молодых белых мышей, у которых при внутрибрюшинном заражении развивается активный актиномикоз.

Актиномикозом болеет и человек. Болезнь сопровождается образованием инфильтратов, гнойных очагов, содержащих зерна или нити актиномицетов (так называемые друзы), свищей, вскрывающихся наружу или внутрь организма. Как у животных, так и у людей встречается генерализованный актиномикоз.

Эпизоотологические данные. Эти болезни выявляют у многих животных, в особенности у крупного рогатого скота, во всех странах мира. Актиномикозом болеют чаще крупный рогатый скот, кролики, собаки, дикие животные, реже – свиньи, овцы, козы, лошади; актинобациллезом – крупный рогатый скот, буйволы, овцы, свиньи, олени и другие животные. Актиномикозом болеет и человек.

Иногда животные могут быть причиной инфицирования человека. В подавляющем большинстве случаев развитие актиномикоза следует рассматривать как проявление аутоинфекции, которая возникает и прогрессирует на фоне гнойно-воспалительных заболеваний, травм, различных иммунодефицитов. Среди всех актиномицетов наиболее патогенными являются облигатные анаэробы.

Из лабораторных животных к Actinomyces bovis восприимчивы хомяки, молодые белые мыши, крольчата, к Actinobacillus lignieresii – морские свинки, куриные эмбрионы и 7-8 дневные цыплята.

Возбудители длительное время сохраняются во внешней среде – в почве, на растениях. Источником возбудителя являются больные животные, выделяющие возбудителя с гноем из свищей, иногда с выдыхаемым воздухом (при легочной форме). Заражение происходит через поврежденную кожу или слизистые оболочки. Возможно также заражение аэрогенным путем. Актиномицеты вегетируют на злаках, в почве, поэтому факторами передачи возбудителя являются объекты окружающей среды (злаки, почва, подстилка и т. д.), контаминированные актиномицетами.

При эндогенном заражении возбудитель поступает в ткани из мест его сапрофитного обитания, главным образом из ротовой полости, пищеварительного тракта. В ряде случаев для заболевания необходимо наличие гиперсенсибилизации или ассоциации с другими бактериями, обитающими в организме (микст-инфекция).

Предубойная диагностика. В местах локализации актиномиком обнаруживают различной величины шаровидные или дольчатые опухоли. У крупного рогатого скота процесс чаще локализуется у корня языка или на челюстях и реже - на коже головы, шеи, межчелюстном пространстве, глотке, пищеводе, в грудных и брюшных органах. У крупного рогатого скота наблюдается костный актиномикоз, чаще – на нижней челюсти и редко – на верхней. Кости сильно разрастаются и пронизаны массой свищевых ходов, содержащих гной, видно вздутие костей, иногда огромных размеров, кожа на поверхности деформируется, пронизана фистулами, в которых просматривается желто-красное образование губчатого строения. При поражении кожи заметны плотные бугристые неподвижные опухоли, иногда - изъязвленные фистулами и грибовидными разращениями тканей губчатого строения с наличием диффузных плотных утолщений кожи. У крупного рогатого скота поражаются лимфатические узлы головы: они увеличены, бугристы и плотны. Актиномикоз вымени у коров обычно локализуется в задних его долях, обнаруживаются узлы различной величины и абсцессы с выделениями гноя, а также язвы розового цвета с неровными краями. При надавливании на опухоль выделяется гной.

У свиней поражаются вымя, миндалины, челюстные кости, гортань, язык, отдельные кости туловища.

Овцы и козы болеют актиномикозом редко. Процесс локализуется преимущественно на языке, губах, нижней челюсти, легких. У лошадей признаки болезни отмечают на семенном канатике после кастрации и в виде опухоли в других органах.

Послеубойная диагностика. При вскрытии актиномикомы заметны гранулемы губчатого строения, содержащие гной. Поверхность разреза выпячивается, при надавливании выходят трубочки густого гноя, не прилипающего к ножу и без ихорозного запаха. Гной содержит крупинки желтого цвета, представляющие собой скопление друз лучистого гриба. Опухоль имеет выраженную капсулу. Соединительная ткань значительно развита по всей опухоли. Если поражены печень, легкие и другие внутренние органы, то обнаруживают обширные размягченные очаги, заполненные гноем.

Пораженный язык сильно увеличен, плотный на ощупь («деревянный язык»), содержит опухоль с сильно развитой соединительной тканью.

Актиномикозные опухоли в отличие от туберкулезных необызвествляются, не поражаются регионарные лимфатические узлы внутренних органов. В отличие от абсцессов актиномикомы содержат светло-желтый гной, густой, немажущийся, без ихорозного запаха.

Лабораторная диагностика. Сводится к микроскопическому исследованию содержимого актиномикозных очагов, гноя, экссудата, в которых обнаруживаются друзы, состоящие из нитей актиномицетов. Исследуют как неокрашенные, так и окрашенные препараты.

При изучении морфологии возбудителя актиномикоза в неокрашенных препаратах исследуемый материал смешивают с раствором антибиотиков (пенициллин и стрептомицин из расчета 100 ЕД/мл) в соотношении 1:5 и центрифугируют при 1500-2000 оборотов в минуту в течение 15-20 минут. Осадок отмывают физиологическим раствором, отбирают друзы (желтоватые крупинки), переносят их на предметное стекло в каплю 10-20 % раствора едкой щелочи (КОН, NaOH) и слегка подогревают. Осадок можно также поместить в смесь глицерина с этиловым спиртом в равных объемах или в физиологический раствор (0,85 % раствор NaCl); микроскопируют вначале при увеличении (10x5), а затем при среднем увеличении микроскопа (20-40х5-15).

Иммерсионный объектив используют главным образом для просмотра препаратов, окрашенных по Граму. Этот же метод используют для окраски препаратов, приготовленных из культур Act. bovis, которые получают путем посева патологического материала на агар Сабуро или другие питательные среды. Наличие в препаратах мицелия и спор является достаточным основанием при установлении лабораторного диагноза на актиномикоз.

Иммунитет. Природа иммунитета при актиномикозе изучена недостаточно. Считается, что после переболевания животные заражаются повторно, хотя в сыворотках крови переболевших установлены агглютинины, преципитины, комплементсвязывающие антитела. В качестве антигена используют фильтрат лизированных бульонных культур актиномицетов.

Лечение. Лучшим средством для лечения актиномикоза животных считают йодистые препараты (йодистый калий или йодистый натрий), которые инъецируют в пораженные участки, вводят внутрь (per os) или внутривенно. Применяют пенициллин, стрептомицин.

Не рекомендуется выпасать больных животных на заболоченных пастбищах, а также скармливать им грубые корма.

Ветеринарно-санитарная оценка и мероприятия. При поражении актиномикозом только лимфатических узлов головы, их удаляют, а голову направляют на проварку. При поражении костей и мускулатуры головы, ее целиком направляют на утилизацию.

При ограниченном поражении актиномикозом внутренних органов и языка их выпускают после удаления пораженных мест, при обширных поражениях внутренних органов и языка их направляют на утилизацию.

При распространенном актиномикозном процессе с поражением костей, внутренних органов, мускулатуры, тушу вместе со всеми органами направляют на утилизацию.

Тушу и непораженные органы выпускают без ограничения. Для дезинфекции применяют 2-3 % растворы едкой щелочи или свежегашеную известь.