Изучение сезонного биоритма бациллярно-кокковой трансформации бактерии Helicobacter pylori

дипломная работа

1.5.1 Кокковые формы H.pylori

Тот факт, что кокковые формы H.pylori не культивируется in vitro, привел некоторых авторов к предположению, что они являются дегенерирующими или мертвыми формами бактерии. Но в тоже время ряд исследований доказывает, что они могут сохранять метаболическую активность, хотя и в меньшей степени, чем активные пролифирирующиее клетки.

Было убедительно показано, что кокковые формы H. pylori сохраняют клеточные структуры, свойственные спиралевидным формам H.pylori, но некоторые из антигенов (CagA и porin) в ходе трансформации спиралей в кокки исчезали. Поэтому кокковые формы H.pylori могут рассматриваться как вполне жизнеспособные и представлять собой одну из стадий биологического цикла H.pylori [38].

Часто в условиях in vitro кокки HP встречаются в двух формах, -- дегенеративные и истинные. По ультраструктурным признакам выделяют HP кокки типа А (дегенеративные) и типа В (истинные). Тип А характеризуется нерегулярными поверхностными и внутрицитоплазматическими структурами, которые плотно смыкались друг с другом. Тип B имеет гладкую поверхность с нитями (флагеллами), намотанными вокруг его собственного тела, а также строго перепончатые структуры. [39] Тип А часто можно наблюдать у пациентов, прошедших эрадикацию.

Кокковые формы типа В сохраняют способность синтезировать белки после 100 дневной инкубации в фосфатном буфере или в дистиллированной воде при 4С [40], а так же при культивировании в анаэробных условиях в течение 7 дней [41]. Показана способность истинных кокковых форм к адгезии и инвазии эпителиальных клеток [42]. Дольше всего кокковые формы сохраняются в изотонической среде при температуре ниже 150С, тогда как при t=370C они быстро теряют жизнеспособность. [43]

Ранние стадии кокковых форм сохраняют жгутики и подвижность, аналогичную спиральным формам, а также полярную мембрану, ассоциированную с базальным комплексом жгутиков. Эксперименты на гнотобионтах показали что неподвижные или малоподвижные штаммы H.pylori менее вирулентны, чем подвижные штаммы. Лишь небольшое количество кокковых форм H.pylori обладает полным набором жгутиков и сохраняет метаболическую активность, обеспечивающую их подвижность, сравнимую к таковой у спиралевидных форм.

Содержание уреазы в кокковых формах H.pylori снижено на 40 % по сравнению со спиралевидными формами. Несмотря на то, что при трансформации в кокковые формы H.pylori возможна утрата уреазной активности, в них посредством полимеразной цепной реакции продолжают выявляться гены, кодирующие уреазу (белок 26-kDa). [43]

Вирулентность кокковых форм HP была показана в эксперименте с заражением мышей. Три штамма H. pylori, изолированных из гастробиоптатов пациентов с язвами, были конвертированы из спиралевидных форм в кокковые формы, путем перенесения и выдерживания в стерильной воде. Одну группу мышей линии BALB/c заражали кокками HP, а другую заражали спиралевидными формами путем внутрижелудочного введения. Хеликобактериоз в СОЖ у инфицированных мышей подтверждали гистологическим и уреазным методами. На 21-й и на 28-й день после прививки в обеих экспериментальных группах путем электронной микроскопии в СОЖ зараженных мышей были выявлены спирали, бациллы и кокки. Гистологическое исследование показало повреждение клеток эпителия СОЖ, появление язв и эрозий. СОЖ была повреждена в большей степени у мышей, инфицированных кокками H. pylori. Подобных результатов не было получено в контрольной группе животных, которым внутрижелудочно вводили стерильную воду. Представленные экспериментальные данные указывают на патогенность кокковых форм HP, т.е. на их способность колонизировать СОЖ и вызывать гастриты. Также, очевидно, что кокковые формы хеликобактера могут трансформироваться обратно в спиралевидные формы. [44] Предполагается, что при фекально-оральном пути, который рассматривается как основной путь распространения H.pylori, заражение происходит именно через его кокковые формы [43].

Имеются предварительные данные, указывающие на то, что именно в период трансформации спиралевидных форм H.pylori в кокковые наблюдается максимальная активизация продукции ими активных форм кислорода. Различные конформационные типы неспиралевидных форм H.pylori обладают особенностями метаболизма, направленными на повышение устойчивости микроорганизма к различным экзогенным, в том числе и к терапевтическим воздействиям. [43]

В слизистой оболочке желудка встречаются и спиральные, и кокковые формы H.pylori, причем в разных соотношениях. Первый вариант H.pylori - обсемененности СОЖ - кокко_бациллярный (сочетанным). Он характеризуется тем, что в одном биоптате одновременно присутствуют и спиралевидные и кокковые формы H.pylori. Второй вариант H.pylori - обсемененности СОЖ -- бациллярный. При этом варианте в биоптате присутствуют только спиралевидные формы H.pylori. И, наконец, в третьем варианте H.pylori - обсемененности СОЖ, в гастробиоптатах обнаруживаются только кокковые формы H.pylori.

Важно отметить, что и у пациентов после эрадикации в биоптатах слизистой оболочки желудка кокковые формы H.pylori могут преобладать над спиралевидными, в большинстве случаев в биоптатах из антрального отдела желудка [46].

Таким образом, имеющиеся литературные данные указывают на то, что наряду с дегенерирующими бактериальными клетками H.pylori, которые имеют свои морфологические особенности и внешне выглядят как кокки, существуют и истинные - жизнеспособные кокковые формы H.pylori, которые имеют свои морфологические критерии и способны трансформироваться обратно в спиралевидные формы. К тому же, они выдерживают больший диапазон рН, способны сохраняться анаэробных условиях и в холодной воде, а так же более устойчивы к антибиотикам.

Делись добром ;)