logo search
Методичка БФХ / БФХ

Контрольная работа № 2

Контрольная работа состоит из одного теоретического вопроса и двух задач, аналогичных приведенным ниже.

Теоретические вопросы

  1. Вывод интегральной формы уравнения Михаэлиса-Ментен.

  2. Применение интегральной формы уравнения Михаэлиса-Ментен к случаю ингибирования продуктом, вывод и анализ уравнения.

  3. Влияние рН на скорость ферментативных реакций, вывод и анализ уравнения.

  4. Влияние температуры на скорость ферментативных реакций.

  5. Применение интегральной формы уравнения Михаэлиса-Ментен к случаю необратимой инактивации фермента.

  6. Нестационарная кинетика, классификация.

  7. Достоинства и недостатки методов нестационарной кинетики.

  8. Стационарная кинетика.

  9. Иммобилизация ферментов, классификация.

  10. Достоинства и недостатки вариантов иммобилизации ферментов.

  11. Модуль Тиле.

Задачи

Задача 1.

При изучении влияния н-бутанола на кинетику гидролиза сложных эфиров при [E]0=6,05*10-5мг/л получены следующие результаты:

[S]0, моль/л

r0, моль/л*мин

[бутанол]=0,05 моль/л

[бутанол]=0,10 моль/л

1,00*10-4

16,7*10-5

13,5*10-5

0,5*10-4

12,5*10-5

10,0*10-5

0,33*10-4

10,5*10-5

7,7*10-5

0,25*10-4

8,8*10-5

6,1*10-5

0,20*10-4

7,7*10-5

5,3*10-5

Определите все возможные кинетические параметры.

Задача 2.

Определите тип ингибирования и все кинетические параметры процесса.

Известно, что соли ароматических кислоты могут выступать в роли ингибиторов ферментативной активности. Определите тип ингибирования, вызванный бензоатом натрия, и все кинетические параметры исходя из данных таблицы. [E]0=4,0*10-6мг/л.

[S]0, моль/л

r0, моль/л*мин

[бензоат]=0,5 моль/л

[бензоат]=1,0 моль/л

1,0*10-5

10,0*10-7

5,0*10-7

1,8*10-5

13,7*10-7

6,8*10-7

2,0*10-5

14,3*10-7

7,1*10-7

4,0*10-5

18,1*10-7

9,1*10-7

8,0*10-5

21,0*10-7

10,5*10-7

Задача 3.

Результаты исследования влияния метйодида-2-пиридинкарбальдоксима на кинетику гидролиз 1-нафтилацетата, катализируемого ацетилхолинэстеразой, представлены в таблице. Определите тип ингибирования и все кинетические параметры. [E]0=1,2*10-6моль/л

[S]0, моль/л

r0, моль/л*мин

[J]=2,0*10-4моль/л

[J]=4,0*10-4моль/л

0,50*10-5

6,3*10-7

3,1*10-7

0,91*10-5

9,4*10-7

4,7*10-7

1,00*10-5

10,0*10-7

5,0*10-7

2,00*10-5

14,3*10-7

7,1*10-7

4,00*10-5

18,2*10-7

9,1*10-7

Задача 4.

При исследовании влияния СоА на начальную скорость реакции фосфотрансацетилирования, катализируемой фосфат-ацетилтрансферазой получены следующие результаты:

[S]0, моль/л

r0, моль/л*мин

[СоА]=6,0*10-5моль/л

[СоА]=15,0*10-5моль/л

0,50*10-5

10,0*10-7

6,3*10-7

0,91*10-5

13,7*10-7

9,4*10-7

1,00*10-5

14,3*10-7

10,0*10-7

2,00*10-5

18,1*10-7

14,3*10-7

4,00*10-5

21,0*10-7

18,2*10-7

Определите все возможные кинетические параметры.

Задача 5.

При исследовании кинетики гидролиза триацилглицеридов было установлено, что реакция не проходит полностью. Определите все кинетические параметры процесса исходя из данных таблицы.

[S]0, моль/л

1,98*10-5

2,55*10-5

3,08*10-5

4,10*10-5

6,09*10-5

8,11*10-5

[S]конечн, моль/л

0,73*10-5

0,94*10-5

1,14*10-5

1,52*10-5

2,25*10-5

3,0*10-5

r0, моль/л*с

4,15*10-6

4,65*10-6

5,13*10-6

5,89*10-6

6,63*10-6

7,15*10-6

Докажите, что в описанном случае фермент инактивируется в свободном виде, для этого проанализируйте зависимость [S]конечн =f([S]0).

Задача 6.

Реакция восстановления пирувата катализируемая лактатдегидрогеназой ингибируется высокими концентрациями субстрата. Найдите все кинетические параметры процесса если известно, что [E]0=2,0*10-5ммоль/л.

[S]0*104, моль/л

0,2

0,29

0,4

0,5

1,0

5,0

7,0

11,0

30,0

50,0

70,0

100

r0*106, моль/л*с

3,2

3,7

4,1

4,4

4,9

4,9

4,3

3,9

2,4

1,8

1,5

1,1

Задача 7.

При исследовании кинетики гидролиза триацилглицеридов было установлено, что реакция не проходит полностью. Определите все кинетические параметры процесса исходя из данных таблицы.

[S]0, моль/л

2,0*10-5

2,8*10-5

3,9*10-5

5,1*10-5

10,2*10-5

[S]конечн, моль/л

0,2*10-5

1,0*10-5

2,1*10-5

3,3*10-5

8,4*10-5

r0, моль/л*с

3,15*10-6

3,70*10-6

4,10*10-6

4,39*10-6

4,92*10-6

Докажите, что в описанном случае фермент инактивируется в виде фермент-субстратного комплекса, для этого проанализируйте зависимость [S]конечн =f([S]0).

Задача 8.

В таблице приведена рН-зависимость гидролиза семикарбазида N-формил-L-фенилаланина. Определите рКа, рК’а,k2и Кs.

рН

5,47

5,95

6,47

6,98

7,48

7,79

kкат, 1/с

0,32*10-2

0,96*10-2

1,92*10-2

2,44*10-2

3,06*10-2

2,88*10-2

Kм, моль/л

7,00*10-3

6,70*10-3

5,60*10-3

3,45*10-3

2,24*10-3

2,28*10-3

Работа оценивается в 20 баллов.

Всего на 7-9 неделях можно получить 20 баллов, а за весь семестр 60 баллов.