4. Примеры промышленного использования микробиологических трансформаций
Получение гидрокортизона (кортизола) из вещества S осуществляется с помощью С. Linata.
Процесс включает следующие стадии:
1. Выращивание трансформирующей культуры (I стадия) производят путем трех последовательных генераций на питательной среде, содержащей сахарозу, дрожжевой автолизат и сложный набор неорганических солей:
Крышку инокулятора перед засевом обрабатывают водным раствором формалина, аппарат и все помещение облучают бактерицидной лампой и весь процесс выращивания трансформирующей культуры проводят в стерильных условиях. Далее полученная трансформирующая культура поступает в сепаратор, откуда отделенный мицелий в виде водной суспензии передается в ферментер для проведения основной реакции трансформации вещества S.
2. Трансформация вещества S (II стадия) также начинается со стерилизации ферментера и воздушного фильтра водным раствором формалина. Особое внимание уделяется размолу стероида на микромельнице и получению суспензии его в стерильной воде с содержанием стероида 1 г/л. Для предотвращения развития посторонней микрофлоры используется добавка антибиотика. Перемешивание и аэрация осуществляются, как и на предыдущей стадии, так же используются и пеногасители.
3. Выделение продукта трансформации -- гидрокортизона (III стадия). Культуральная жидкость вместе с мицелием после II-й стадии поступает на сепарацию. Отделенный мицелий промывается, промывные воды присоединяются к основной культуральной жидкости. Далее производится экстракция-сепарация продукта трансформации из водной среды органическим растворителем. Осветленный активированным углем экстракт подвергается многократному упариванию с различными растворителями, осветлению, снова упариванию досуха и промывке подходящим растворителем. Последние приемы обработки готового технического продукта обычны для технологии получения многих органических веществ и лекарственных препаратов. Получение чистых лекарственных форм гидрокортизона проводится традиционными методами.
Трансформация гидрокортизона в преднизолон
Выращивание трансформирующей культуры М. gtobiforme осуществляется такими же последовательными этапами и в тех же аппаратах при тех же условиях аэрации и перемешивания, далее проводится трансформация гидрокортизона с помощью названной дегидрирующей культуры. Выделение готового продукта -- преднизолона, осуществляется также путем экстракции-сепарации из культуральной жидкости, отличаясь лишь набором растворителей.
В настоящее время интенсивно разрабатываются методы использования мелкокристаллических стероидных субстратов. Микронизация субстрата до размеров частиц в несколько микрометров и внесение в ферментационную среду без растворителя позволяет повысить исходную концентрацию стероидного субстрата до 20--50 г/л.
- Введение
- 1. Микробиологические трансформации органических соединений
- 2. Микробиологические трансформации стероидов
- 2.1 Стерины
- 2.2 Основные микробиологические превращения стероидов
- 2.2.1 Введение гидроксильной группы
- 2.2.2 Дегидрогенизация стероидов
- 2.2.3 Микробиологическое восстановление
- 2.2.4 Окисление гидроксильной группы в кетогруппу
- 2.2.5 Гидролиз эфиров стероидов
- 2.2.6 Отщепление боковых цепей стероидов.
- 3. Методы проведения процессов микробиологических трансформаций
- 4. Примеры промышленного использования микробиологических трансформаций
- Микробиологический метод
- Тема 6. Методы микробиологической диагностики.
- Методы проведения санитарно-микробиологических исследований
- Проблемы трансформации стероидных структур. Микробиологический синтез гидрокортизона.
- 77.Проблемы трансформации стероидных структур. Микробиологический синтез гидрокортизона.
- 1.3 Микробиологический метод
- Занятие 15.
- Методы проведения санитарно-микробиологических исследований